Microscopy ya Fluorescence imebadilisha uwezo wetu wa kuibua na kusoma vielelezo vya kibiolojia, na kuturuhusu kuzama katika ulimwengu tata wa seli na molekuli. Kipengele muhimu cha hadubini ya fluorescence ni chanzo cha mwanga kinachotumiwa kusisimua molekuli za fluorescent ndani ya sampuli. Kwa miaka mingi, vyanzo mbalimbali vya mwanga vimetumiwa, kila moja ikiwa na sifa na faida zake za kipekee.
1. Taa ya Mercury
Taa ya zebaki yenye shinikizo la juu, kutoka kwa wati 50 hadi 200, imeundwa kwa kutumia kioo cha quartz na ina sura ya spherical. Ina kiasi fulani cha zebaki ndani. Wakati inafanya kazi, kutokwa hutokea kati ya electrodes mbili, na kusababisha zebaki kuyeyuka, na shinikizo la ndani katika nyanja huongezeka kwa kasi. Utaratibu huu kawaida huchukua kama dakika 5 hadi 15.
Utoaji wa taa ya zebaki yenye shinikizo kubwa hutokana na kutengana na kupunguzwa kwa molekuli za zebaki wakati wa kutokwa kwa elektrodi, na kusababisha utoaji wa fotoni nyepesi.
Inatoa mwanga mkali wa ultraviolet na bluu-violet, na kuifanya kufaa kwa vifaa mbalimbali vya kusisimua vya fluorescent, ndiyo sababu hutumiwa sana katika microscopy ya fluorescence.
2. Taa za Xenon
Chanzo kingine cha taa nyeupe kinachotumiwa kwa kawaida katika hadubini ya fluorescence ni taa ya xenon. Taa za Xenon, kama taa za zebaki, hutoa wigo mpana wa urefu wa mawimbi kutoka kwa ultraviolet hadi karibu na infrared. Hata hivyo, wanatofautiana katika spectra yao ya kusisimua.
Taa za zebaki huzingatia utoaji wao katika maeneo ya karibu ya urujuanimno, buluu na kijani, ambayo huhakikisha utolewaji wa mawimbi angavu ya umeme lakini huja na sumu kali ya picha. Kwa hivyo, taa za HBO kwa kawaida huhifadhiwa kwa sampuli zisizobadilika au upigaji picha dhaifu wa umeme. Kwa kulinganisha, vyanzo vya taa vya xenon vina maelezo mafupi ya msisimko, kuruhusu ulinganisho wa kiwango katika urefu tofauti wa mawimbi. Tabia hii ni nzuri kwa matumizi kama vile vipimo vya ukolezi wa ioni ya kalsiamu. Taa za Xenon pia zinaonyesha msisimko mkubwa katika safu ya karibu ya infrared, haswa karibu 800-1000 nm.
Taa za XBO zina faida zifuatazo juu ya taa za HBO:
① Nguvu zaidi ya spectral
② Upeo mkali zaidi wa mwanga katika maeneo ya infrared na katikati ya infrared
③ Utoaji mkubwa wa nishati, unaorahisisha kufikia eneo la lengo.
3. LEDs
Katika miaka ya hivi karibuni, mshindani mpya ameibuka katika eneo la vyanzo vya mwanga vya hadubini ya fluorescence: LEDs. Taa za LED hutoa faida ya kuwasha kwa haraka kwa milisekunde, kupunguza nyakati za kukaribia sampuli na kupanua maisha ya sampuli maridadi. Zaidi ya hayo, mwanga wa LED huonyesha uozo wa haraka na sahihi, na hivyo kupunguza kwa kiasi kikubwa sumu ya picha wakati wa majaribio ya muda mrefu ya seli hai.
Ikilinganishwa na vyanzo vya mwanga mweupe, LEDs kwa kawaida hutoa ndani ya wigo finyu wa msisimko. Hata hivyo, bendi nyingi za LED zinapatikana, zinazoruhusu programu nyingi za rangi nyingi za fluorescence, na kufanya LEDs kuwa chaguo maarufu katika usanidi wa kisasa wa microscopy ya fluorescence.
4. Chanzo cha Mwanga wa Lasers
Vyanzo vya taa vya laser vina muundo mmoja na vina mwelekeo wa juu, na hivyo kuvifanya kuwa bora kwa hadubini ya azimio la juu, ikijumuisha mbinu zenye azimio kuu kama vile STED (Kupungua kwa Uzalishaji Uchafu) na PALM (Hadubini ya Ujanibishaji Uliofanywa kwa Picha). Mwangaza wa leza kwa kawaida huchaguliwa ili kuendana na urefu mahususi wa msisimko unaohitajika kwa fluorophore lengwa, ikitoa uteuzi wa hali ya juu na usahihi katika msisimko wa fluorescence.
Uchaguzi wa chanzo cha mwanga cha darubini ya fluorescence inategemea mahitaji maalum ya majaribio na sifa za sampuli. Tafadhali jisikie huru kuwasiliana nasi ikiwa unahitaji usaidizi wowote
Muda wa kutuma: Sep-13-2023